Mengungkap Aktivitas Antijamur dengan Poisoned Food Technique
Pengujian aktivitas antijamur menjadi salah satu langkah penting untuk mengetahui kemampuan suatu bahan dalam menghambat pertumbuhan jamur. Salah satu metode yang dapat digunakan adalah poisoned food technique.
Metode ini banyak dimanfaatkan untuk mengevaluasi potensi aktivitas antijamur dari bahan alami, seperti ekstrak tumbuhan dan minyak atsiri.
Daftar Isi:
Mengenal Poisoned Food Technique
Poisoned food technique merupakan metode pengujian aktivitas antijamur yang terutama digunakan untuk mengevaluasi kemampuan suatu bahan dalam menghambat pertumbuhan jamur. Metode ini banyak digunakan dalam skrining awal ekstrak tumbuhan dan senyawa alami yang berpotensi sebagai antijamur.
Prinsipnya adalah mencampurkan bahan uji secara langsung ke dalam media agar sebelum mikroorganisme diinokulasikan. Dengan demikian, jamur tumbuh pada media yang telah mengandung senyawa uji, sehingga pengaruh bahan tersebut terhadap pertumbuhan koloni dapat diamati dan dibandingkan dengan media kontrol yang tidak mengandung bahan antimikroba.
Pengujian diawali dengan menyiapkan media agar yang mengandung bahan uji pada konsentrasi tertentu serta media kontrol tanpa penambahan bahan tersebut. Selanjutnya, potongan agar berdiameter sekitar 3–6 mm yang mengandung jamur diambil dari bagian tepi koloni yang sedang aktif tumbuh, kemudian diletakkan di tengah cawan Petri.
Pemilihan bagian tepi koloni bertujuan untuk memperoleh inokulum dengan pertumbuhan miselium yang aktif. Seluruh cawan kemudian diinkubasi pada suhu dan durasi yang sesuai dengan jenis jamur yang digunakan.
Setelah inkubasi, diameter koloni pada media perlakuan dan kontrol diukur untuk mengetahui perbedaan pertumbuhannya. Aktivitas antijamur pada metode ini dapat dinyatakan sebagai persentase penghambatan pertumbuhan koloni.
Perhitungannya dilakukan dengan mengurangi diameter koloni pada kontrol dengan diameter koloni pada perlakuan, kemudian membaginya dengan diameter koloni kontrol dan mengalikannya dengan 100%. Sebagai contoh, apabila diameter koloni pada kontrol mencapai 60 mm, sedangkan pada perlakuan hanya 15 mm, persentase penghambatannya adalah 75%.
Hasil tersebut menunjukkan bahwa pertumbuhan koloni pada media yang mengandung bahan uji mengalami penghambatan sebesar 75% dibandingkan kontrol. Nilai ini menggambarkan penghambatan pertumbuhan, tetapi tidak secara langsung membuktikan bahwa bahan uji membunuh jamur.
Sampel yang dapat diuji menggunakan metode ini antara lain ekstrak daun sirih, ekstrak kayu manis, ekstrak cengkeh, minyak atsiri tumbuhan, maupun senyawa antijamur sintetis. Sebagai contoh, ekstrak daun sirih dapat dicampurkan ke dalam media agar untuk mengevaluasi kemampuannya menghambat pertumbuhan kapang seperti Aspergillus atau Fusarium, dengan pemilihan spesies berdasarkan tujuan penelitian.
Pengujian dapat dilakukan pada beberapa konsentrasi untuk mengetahui apakah peningkatan konsentrasi diikuti oleh peningkatan penghambatan. Penggunaan metode ini dalam penelitian bahan alami relevan untuk skrining awal kandidat antijamur, tetapi jenis jamur, konsentrasi, media, serta kondisi inkubasi harus ditentukan berdasarkan protokol yang sesuai.
Baca Juga:
Kenali Candida albicans, untuk Mengembangkan Produk Antijamur yang Lebih Efektif
Menimbang Kelebihan dan Keterbatasan Poisoned Food Technique
Salah satu kelebihan poisoned food technique adalah prosedurnya relatif sederhana dan memungkinkan pengujian beberapa konsentrasi bahan secara bersamaan. Metode ini juga menghasilkan data kuantitatif berupa persentase penghambatan, sehingga aktivitas antijamur berbagai sampel dapat dibandingkan.
Oleh karena itu, metode ini sesuai digunakan sebagai skrining awal untuk mengetahui potensi bahan alami maupun senyawa sintetis sebagai aktivitas antijamur. Namun, hasil pengujian dapat dipengaruhi oleh kelarutan, kestabilan, dan kemampuan bahan uji untuk tercampur secara merata dalam media agar.
Distribusi bahan yang tidak seragam dapat memengaruhi pertumbuhan jamur dan menyebabkan hasil pengukuran kurang akurat. Untuk mengurangi pengaruh tersebut, pengujian perlu menggunakan kontrol yang sesuai serta dilakukan dengan beberapa ulangan.
Selain itu, metode ini mengukur penghambatan berdasarkan pertumbuhan koloni sehingga tidak dapat langsung membuktikan bahwa bahan uji membunuh jamur. Hasil penghambatan yang tinggi belum tentu menunjukkan aktivitas fungisidal karena jamur mungkin masih dapat tumbuh kembali setelah bahan antimikroba dihilangkan.
Oleh sebab itu, diperlukan pengujian lanjutan jika penelitian bertujuan menentukan konsentrasi hambat minimum (MIC) atau konsentrasi bunuh minimum (MFC).
Validasi Efikasi Antijamur Produk Anda Secara Ilmiah Sekarang!
Jangan biarkan risiko kontaminasi jamur merusak kualitas, umur simpan (shelf-life), dan reputasi produk Anda. Pastikan efektivitas agen aktivitas antijamur dalam formulasi Anda tervalidasi secara akurat melalui metode Poisoned Food Technique.
Konsultasikan kebutuhan pengujian mikrobiologi Anda dengan laboratorium analitik independen, IML Testing and Research. Dapatkan data persentase daya hambat yang presisi dan pasarkan produk Anda dengan landasan sains yang kuat!
Author: Dherika
Editor: Lina
Referensi
Achar, P. N., Quyen, P., Adukwu, E. C., Sharma, A., Msimanga, H. Z., Nagaraja, H., & Sreenivasa, M. Y. (2020). Investigation of the Antifungal and Anti-Aflatoxigenic Potential of Plant-Based Essential Oils against Aspergillus flavus in Peanuts. Journal of Fungi, 6(4), 383. https://doi.org/10.3390/jof6040383.
Hossain, T.J. (2024). Methods for Screening and Evaluation of Antimicrobial Activity: A Review of Protocols, Advantages, and Limitations. European Journal of Microbiology and Immunology, 14(2), 97-115.
